Chromatographie en phase liquide (CPL)

Durée : 04 semaines

Objectifs pédagogiques :

A la fin de la formation, les stagiaires peuvent :

  • Démarrer et arrêter un chromatographe
  • Déterminer les paramètres de programmation pour une analyse
  • Mettre au point des méthodes pour une bonne séparation des produits
  • Choisir les colonnes appropriées pour une analyse
  • Identifier et résoudre les problèmes simples inhérents à un chromatographe

THEORIE

A) Description de l’appareillage utilisé en HPLC – Considérations pratiques

  • Pompe (isocratique et système gradients)
  • Injecteurs (manuels et automatiques)
  • Colonnes, les différents types et leurs entretiens
  • Phases stationnaires
  • Phases mobiles : ses constituants et sa préparation
  • Détecteurs, leurs applications et leurs limites (UV, réfractomètre, fluorescence, électrochimique, conductimétrique)
  • Accessoires divers

B) Grandeurs fondamentales en chromatographie liquide

  • Rétention
  • Sélectivité
  • Efficacité d’une colonne et nombre de plateaux théoriques
  • Résolution
  • Perte de charge
  • Capacité disponible

C) Principaux types de chromatographie ; les colonnes utilisées et quelques exemples significatifs

  • Adsorption
  • Partage sur phases stationnaires greffées
  • Echange d’ions
  • Ionique
  • Paire d’ions
  • Echange de ligands
  • Exclusion

D) Analyse quantitative

  • Choix d’un mode de séparation et optimisation de l’analyse
  • Exemples d’application de la HPLC dans divers domaines

E) Problèmes rencontrés en HPLC

  • Anomalies de fonctionnement, maintenance
  • Bibliographie

TRAVAUX PRATIQUES

A) Mise en route des divers constituants d’une chaîne HPLC

  • Préparation d’une phase mobile
  • Etude sur l’injection d’un standard de divers paramètres physiques (volume d’injection, problème des volumes mortes, utilisation de diverses longueurs d’onde en UV et problèmes associés)

B) Mise en évidence des grandeurs fondamentales en chromatographie liquide

C) Etude des trois modes chromatographie les plus utilisés

  • absorption
  • partage sur phase stationnaire greffée
  • paire d’ions

D) Mise au point d’une séparation plus complexe

  • Dosage des constituants en mélange dans un solvant
  • Mesure des surfaces (utilisation d’un intégrateur)

E) Démontage et remontage d’un chromatographe ; problèmes simples de maintenance

F) Discussions et conclusion

Devenir un membre

Vous êtes un organisme ou unité de recherche, ou un laboratoire, le Consortium est en mesure de vous appuyer pour devenir membre. De nombreuses opportunités s’offrent à vous en tant que laboratoire accréditée.

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Contact

Laboratoire de contrôle
des pesticides

NANISANA-ANTANANARIVO

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+261 20 22 543 78

Organismes d’accréditation

COMESA ILAC.COM SADC